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人胃癌細(xì)胞要這怎么冷凍
更新時(shí)間:2017-12-26 點(diǎn)擊次數(shù):1474次
   人胃癌細(xì)胞;HGC-27培養(yǎng)冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(shí)(或隔夜)→液氮槽長期儲(chǔ)存。人胃癌細(xì)胞冷凍保存方法二:冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲(chǔ)存。-20℃不可超過1小時(shí),以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
  
  人胃癌細(xì)胞細(xì)胞形態(tài)生長狀態(tài)良好的細(xì)胞,在一般顯微鏡下觀察時(shí)可見,細(xì)胞透明度大、折光性強(qiáng)、輪廓不清。細(xì)胞生長不良時(shí),輪廓增強(qiáng),胞質(zhì)中常出現(xiàn)空泡、脂滴和其他顆粒狀物,人胃癌細(xì)胞之間空隙加大,細(xì)胞形態(tài)可變得不規(guī)則甚至失去原有特點(diǎn),如上皮細(xì)胞變成類上皮細(xì)胞等。某些染料當(dāng)細(xì)胞死亡時(shí)能透過變性的胞膜與解體的細(xì)胞核DNA結(jié)合,而令其著色。因而常用臺(tái)盼藍(lán)鑒別細(xì)胞死活,活細(xì)胞不著色,死細(xì)胞核呈藍(lán)色。
  
  人胃癌細(xì)胞細(xì)胞生長初代培養(yǎng)或傳代的細(xì)胞懸液接種以后,經(jīng)過長短不同的潛伏期后開始增殖。傳代細(xì)胞系、胚胎組織或幼體組織一般在第二天即可見細(xì)胞生長,一周內(nèi)便可連接成片。接種細(xì)胞長滿瓶壁后,應(yīng)及時(shí)做再培養(yǎng)。否則由于營養(yǎng)物消耗和代謝積累,細(xì)胞即進(jìn)入停止期或退化期。此時(shí)細(xì)胞輪廓增強(qiáng),細(xì)胞內(nèi)常出現(xiàn)顆粒狀堆積物,為膨脹的線粒體,人胃癌細(xì)胞質(zhì)呈空泡化,細(xì)胞變圓、粗糙,嚴(yán)重時(shí)細(xì)胞從瓶壁脫落,只有及時(shí)再做傳代處理,才能使細(xì)胞繼續(xù)生長繁殖。
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